海洋赤潮生物毒素——西加鱼毒的提取

---

制法

西加鱼毒目前不能合成，只能从含西加鱼毒的鱼类和有毒的赤潮生物细胞中提取，现已分离出三种西加鱼毒毒素的成分：西加鱼毒素、刺尾鱼毒素和鹦嘴鱼毒素，前两种为主要成分。

(1)从鳃环裸胸鳝肌肉中提取

①取出一定量的肉体用水煮。

②用丙酮提取，浓缩。

③将浓缩物在水和醚中进行再分配。

④将醚层进一步用层析法和Sephadex柱分离，纯化，得到西加鱼毒素。

(2)从含西加鱼毒的裸胸鳝内脏中提取

因为内脏中毒素含量比肌肉中含量要高，有的高几十倍。

①取出一定量的裸胸鳝内脏，捣碎，用丙酮提取。

②提取液过滤后用乙醚－水进行分离，用正己烷脱脂。

③在不同的色谱柱(如碱性氧化铝凝胶柱、Biosil－A柱、DEAE纤维柱、SephadexLH柱、Lichroperp RP－18柱)上进行分离，用不同溶液进行洗脱，得到不同成分的西加鱼毒素。

(3)从剧毒的纲比甲藻细胞中提取

①将天然或培养的含西加鱼毒素的剧毒纲比甲藻细胞碾碎。

②用甲醇或甲醇－丙酮作为溶剂进行提取。

③将提取液过滤、浓缩和分离。

④在不同溶剂(乙醚－水、丁醇－水、己烷－甲醇)中进行提取。

⑤提取物经浓缩、蒸发、溶解，过滤后在不同的分离柱上进行分离、提纯，得到不同成分的西加鱼毒素。

(4)从刺尾鱼内脏中提取刺尾鱼毒素

①切碎刺尾鱼内脏。

②用乙醇提取。

③提取液经过滤、浓缩后分别用乙醚、丁醇和水进行提取。

④浓缩提取液，加入丙酮，得到沉淀物。

⑤将沉淀物溶于少量水中，在Sephadex G－100柱上分离，并用水洗脱，得到预提纯的刺尾鱼毒素。

⑥再经不同色谱柱(如硅胶柱、Sephadex G－25柱、纤维柱)分离、洗脱，得到较纯的刺尾鱼毒素。

西加鱼毒素是一种无色、耐热的非结晶体，极易被氧化，易溶于极性有机溶剂，如甲醇、丙酮、乙醇、2－丙醇等，但不溶于苯。直到1989年才确定其化学结构式。

西加鱼毒素由13个连续醚环组成，醚环由5～9个原子组成，其化学结构式与短裸甲藻毒素相似。分子式为C₆₀H₈₈O₁₉，相对分子质量为1112，分子中有6个羟基、5个双键和5个甲基。它是一种高毒化合物，比河豚毒素的毒性高100倍，比短裸甲藻毒素和百房蛤毒素的毒性强很多。

刺尾鱼毒素是一种强极性化合物，相对分子质量为3401，但结构式至今未确定。