原位杂交situ hybridization分子杂交的一种形式。由未经抽提分离的染色体DNA,在原来位置上被变性成单链后,与探针进行分子杂交。1977年由本顿(W.D.Benton)和戴维斯(R.W.Davis)在原分子杂交基础上发展的一种较新的分子杂交技术。方法是将菌落或噬菌斑转移到硝酸纤维素滤膜上,使在原位发生溶菌后变性的DNA,同滤膜原位结合,再与有放射性同位素标记的特定核苷酸“探针”杂交,其结果可用放射自显影来显示,出现银粒的地方便是待测染色体DNA上与探针互补顺序所在的位置。对快速检测转化群落中的DNA序列或任何一种插入的DNA序列,以及动植物的基因定位工作,都具有广泛应用价值。(见“分子杂交”、“放射自显影”、“影印培养技术”) 原位杂交DNA分子杂交的一种方法。杂交中的一种DNA处在未经抽提的细胞染色体上,并在原来位置上被变性成单链,再与探针进行分子杂交,杂交结果用放射自显影显示。 原位杂交 原位杂交in situ hybridization核酸保持在细胞组织切片中,经适当方法处理细胞或组织后,将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交的一种方法。根据检测对象的不同可将原位杂交分为细胞内原位杂交和组织切片原位杂交。原位杂交既可检测DNA,也可检测RNA。原位杂交包括组织细胞的固定、预杂交、杂交、冲洗及信号检测等基本步骤。原位杂交能在万分复杂的组织中进行单一细胞的研究而不受同一组织中其他成分的影响,对于那些数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA的研究更为方便,同时具有高灵敏度的优点,用放射性标记的RNA探针可检测到细胞20个拷贝的mRNA。 ☚ 斑点印迹杂交 液相杂交 ☛ 00010125 |