微生物杀虫剂生物测定bioassay of microbialinsecticides

通过观测微生物及其制剂对昆虫的毒效，来衡量微生物杀虫剂毒力大小的杀虫剂生物测定。用五个梯度浓度药液（或剂量）处理一定数量的昆虫，以浓度（或剂量）对数值与相应的死亡率机率值求出毒力回归线，并依此计算出致死中浓度(LC₅₀)或致死中量(LD₅₀)来表示其毒力大小。近10多年来已经有用离体培养的昆虫组织细胞对苏云金杆菌和病毒进行毒力测定的新方法。
试验要求 有下述六方面： ❶供试昆虫要选择其对病原最敏感的发展阶段。严格要求生理状态，龄期、虫体大小一致，如从野外采来的试虫应在室内饲养一代后再作试验 。每组试虫至少10头，应有三个以上重复，并设不用药剂处理的对照组；
❷饲料要定量；
❸温度要恒定；
❹湿度以保持饲料不干为度，以免影响试虫取食。真菌杀虫剂要求较高的湿度(90%相对湿度);
❺整个试验用同一批微生物杀虫剂；
❻应先进行预备试验，找到合适的剂量，使所设计的五个浓度所得的死亡率在15～ 85%之间。
测定步骤 可分为三步： ❶涂布药剂。细菌、病毒、微孢子虫类制剂宜均匀涂布于定量叶片的两面或拌入定量的人工饲料中，随试虫取食时摄入。真菌制剂宜涂于虫体表面或喷洒在试虫的环境中使其同虫体接触；
❷观察记录。每24小时观察一次，记录死亡虫数，或根据微生物杀虫剂的特性和致病过程确定检查天数，一般为3天，但对病毒要观察15～ 20天。微孢子虫发病较缓慢，甚至死亡虫数很少，应观察试虫的发育情况和雌虫的产卵量；
❸结果计算。根据试验结果以死亡率的机率值为纵坐标、浓度（或剂量）的对数值为横坐标，作出毒力回归线，求得致死中浓度（或致死中量）作为毒力比较的依据。
苏云金杆菌制剂中含有芽孢和晶体，用制剂中的芽孢含有量来表示其质量。但活孢子量并不能代表苏云金杆菌的真正毒力。现在国际上通用以国际单位(IU)表示毒力效价，使产品质量标准化。1966年在荷兰举行的国际昆虫病理学和微生物防治会议上，正式指定以地中海粉螟 [Anagastra kuhniella (Zeller)]作供试昆虫，采用法国生产的标准品E-61，其毒力效价为1000IU/毫克。1971年美国生产的标准产品HD-1-5-1971用粉纹夜蛾 [Trichoplusia ni (Hubner)]为供试昆虫与E-61进行标定，其毒力效价为18000IU/毫克。基本公式为：

如一般样品的毒力测定能以一种标准菌株作参考菌株，则可得到此菌株的毒力效价。