萝卜子叶法radish cotyledon method

利用细胞分裂素对萝卜子叶的保绿和增重作用，比较其生物活性的农药生物测定方法。其原理是，细胞分裂素不仅能促进细胞分裂，还能阻止叶绿素、核酸和蛋白质破坏，并有保持有机和无机溶质的功能。使处理面积降解速度放慢，使氨基酸等养分转移到处理区域，促进合成作用。因此，通过处理后子叶重量或叶绿素含量的变化，来比较这类物质的活性大小。此法可测出分裂素最低浓度为10微克/升。赤霉素类物质的磷酸缓冲液也有类似作用。但不受生长素、嘌呤、嘧啶、核苷、氨基酸和维生素等类物质的干扰。
其方法是： 把萝卜种子(约200粒)播于垫有滤纸并用蒸馏水湿润的盘子内，把盘子装在塑料袋内，26℃恒温黑暗培养30小时。从每个幼苗上切下子叶（全部去掉下胚轴），选用大小一致的子叶作试材。取用磷酸缓冲液(2毫摩尔/升，pH5.8～6.0)配制的、不同浓度的细胞分裂素标准溶液和待测物溶液各3毫升，放入培养皿(直径9厘米)内的滤纸上，每皿放10片子叶，加盖后置于25℃、2000～3000勒光照下连续3天。将每个处理的子叶用滤纸吸干后立即称重。以浓度为横坐标，平均子叶重量为纵坐标作图，即可求得待测物含量。也可将子叶捣碎，加10毫升95%的乙醇提取叶绿素，在643～645纳米波长下比色测定，与空白对照相比，计算叶绿素含量变化。