血清铜氧化酶测定
铜氧化酶又称二胺氧化酶或铜蓝蛋白,属α2球蛋白。正常血浆中95%的铜与铜氧化酶结合,4%与白蛋白呈疏松结合,仅有微量的游离铜 (Cu++)。铜氧化酶在肝脏合成,不能通过肾小球,正常人仅有微量的游离铜由尿排出。血浆铜氧化酶的生理意义还不太清楚。已证明铜氧化酶中的铜很少与肠道吸收的铜相互交换,所以铜氧化酶不是铜的运输形式。有迹象提示铜氧化酶可能与铁的吸收、贮存铁的动用以及增加血清铁的交换率等方面有一定作用,且能氧化Fe++成Fe+++,使其有利于与转铁蛋白结合,将铁输送到其他组织。在试管内,铜氧化酶催化底物被氧分子氧化,催化过程中只有氧分子可作为氢的受体而生成水。铜氧化酶能催化的底物很多,有多元醇、多元酚和多元胺等,但无足够的证据说明这种氧化作用也发生于人体内。测定方法主要有:
❶铜氧化酶呈蓝色,约为等浓度硫酸铜的600倍,吸收峰在605nm处,用精密的分光光度计测定铜氧化酶被还原前后的消光值,确定铜氧化酶含量;
❷将铜氧化酶提纯,制成抗血清,以免疫原理测定蛋白含量;
❸利用酶反应测定酶活性。和其他酶相比较,人体内铜氧化酶以蛋白计含量较高。正常值成人血清为250~430mg/L; 新生儿20~130mg/L,一年内迅速上升至310~540mg/L,第二年回降到成人水平。妇女妊娠后期可达400~700mg/L,这与雌三醇的增高密切相关。有人曾利用铜氧化酶含量以推断胎儿是否正常成长;若铜氧化酶水平突然下降,可能反应雌激素的生成下降,胎儿有危象或死亡的可能。服用雌激素或某些激素类避孕药时,也可引起铜氧化酶增高。铜氧化酶也属于急性反应性蛋白,故在肺炎、结核、系统性红斑狼疮、风湿热、类风湿性关节炎、心肌梗塞、肝硬变、甲状腺功能亢进症、急性白血病及恶性肿瘤时,均可增高。肝豆状核变性(Wilson病)时,血清铜氧化酶可<200mg/L,尿铜氧化酶排泄量>100mg/24h,并可伴有氨基酸尿及铜在肝、豆状核、角膜及其他组织沉积。低血清铜氧化酶见于肾病综合征及营养不良等。