冰冻蚀刻
亦称冰冻断裂。 将在超低温下冻结的组织或细胞骤然断开，依断裂面制成复模，用于电镜观察的技术。 通常此技术是把细胞在液氮温度(－196℃)下冰冻，然后用冷刀将冻结的标本撞裂开。暴露出的断裂面在真空中使冰升华，从而显露出标本断开的内部部位的形态结构，这种处理即称为“蚀刻”。在此断开的蚀刻面上，用碳蒸汽和铂蒸汽以一定的角度喷吐，形成一层铂－碳膜。 把膜下方的有机物腐蚀掉，剩下了铂－碳膜。此膜如实反映了断裂面的形态构造，并在突出部位造成了阴影，故把此复印膜称为复模。 把复模拿到电子显微镜下观察即等于观察到标本断裂面的形像。 冰冻蚀刻技术主要用于研究细胞内部结构。 如果生物膜的脂双层分子被断裂开，即可清晰地显示出蛋白质颗粒在膜中的分布。例如，植物细胞叶绿体光合膜中的光合作用单位蛋白质－叶绿素复合物的分布部位，即是用这种技术显示出来的。 |