霍乱弧菌CT操纵子的PCR检测PCR assay of comma vibrio CT operon

霍乱肠毒素(cholera enterotoxin,CT)是01群霍乱弧菌的主要毒力因子。Shirai等建立了检查CT操纵子的位置如下：引物1:5′-CTCAGACGGATTTGTTAGGCACG-3′,711-735位；引物2:3′-GCATTATCCCCGATGTCTCTATCT
-5′,990-1013位，扩增产物(302bp)用5%聚丙稀酰胺凝胶电泳检测，并用合成的与扩增序列特异的寡核苷酸探针进行Southern印迹杂交。探针序列为5′-ACTATATTGTCTGGTC
ATTCTACT-3′。PCR最低能检出1-10pg的模板DNA，扩增产物能与CT操纵子特异的³²P标记的寡核苷酸探针杂交，可用于直接检测腹泻病人的水样便。